آشنایی با کیت اندوتوکسین

خرید بهترین كيت اندوتوكسين

 

توكسين‌ها سم‌هايي هستند كه توسط باكتري‌ها توليد شده يا در داخل باكتري‌ها وجود دارند. توكسين‌ها در زبان فارسي زهرآبه نيز خوانده مي‌شوند. اين سم‌ها در دو دسته اگزوتوكسين‌ها و اندوتوكسين‌ها تقسيم مي‌شوند. 

اگزوتوكسين‌ها پروتئين‌هاي محلولي هستند كه عملكرد آنزيمي دارند و مي‌توانند واكنش‌هاي بيوشيميائي زيادي را كاتاليز كرده و در عين حال مجددا قابل استفاده مي‌باشند. جهت ايجاد سم،‌ مقدار بسيار كمي از اندوتوكسين كافي است. در زمان رشد نمايي و يا ليز سلولي،‌ اگزوتوكسين‌ها به سلول‌هاي اطراف ترشح مي‌شوند. در نتيجه اگزوتوكسين را بايستي يك جزء خارج سلولي بدانيم. اين مواد توسط هر دو گروه باكتري‌هاي گرم منفي و مثبت توليد مي‌شوند. به عنوان مثال باكتري سياه سرفه گرم منفي و باكتري كزاز و ديفتري گرم مثبت محسوب مي‌شود. 

اگزوتوكسين‌ها داراي ماهيت شيميايي پلي پپتيد، مي‌باشد. ژن‌ها در اگزوتوكسين‌ روي پلازميد باكتري‌ها قرار مي‌گيرند. بعد از ورود اين مواد به بدن، بدن شروع به توليد آنتي بادي و آنتي توكسين مي‌كند. آنتي بادي‌ها در درمان و پيشگيري امراضي همچون بوتوليسم و كزاز موثر هستند. اگزوتوكسين‌ها ساختار مولوكولي متشكل از دو واحد A وB  دارند. واحد A سميت اگزوتوكسين را تامين مي‌كند و واحد B وظيفه اتصال به سلول ميزبان را بر عهده دارد. به عنوان مثال بيماري ديفتري بر اثر واحد A ايجاد مي‌شود. در این مقاله می‌خواهیم شما را کمی بیشتر با این نوع محصول و نحوه‌ی خرید کیت اندوتوکسین به بالاترین کیفیت و قیمتی مناسب آشنا کنیم. پس اگر قصد خرید چنین محصولی را دارین، حتما در ادامه با ما همراه باشید.

 

اندوتوكسين چيست؟

 

اندوتوكسين‌ها همان ليپو پلي ساكاريدها هستند كه در باكتري‌هاي گرم منفي نظير شيگلا، سودوموناس، هايموفيلوس، نايسريا، اشرشياكلي،‌سالمونا و آنفولانزا مشاهده مي‌شوند. اندوتوكسين در غشاي خارجي خارجي ديواره سلولي قرار دارد. اندوتوكسين‌ها نسبت به اگزوتوكسين‌ها سميت كمتري دارند. بنابراين قدرت تحريك سيستم ايمني در اندوتوكسين كمتر است. بخش پلي ساكاريدي اندوتوكسين شامل تنوع آنتي ژنيك زيادي مي‌شود و جهش‌هاي متعددي در اين بخش قابل مشاهده است كه سبب ايجاد نژادهاي متعددي از باكتري‌ها مي‌شود. 

اندوتوكسين داراي ساختار مولكولي به اين شرح است. جزء اول فسفوليپيد (ليپيد A‌) كه اثرات توكسيك را ايجاد مي‌كند. جزء دوم هسته پلي ساكاريدي 5 قندي است كه به واسطه مولكولي به اسم KDO به ليپيد A‌ متصل مي‌شود. جزء سوم پلي ساكاريد خارجي است كه يك پليمر آنتي ژن O يا سوماتيك نام دارد كه وظيفه شناسايي باكتري را بر عهده دارد. 

اندوتوكسين‌ها در برابر حرارت پايدار مي‌باشند. از جايي كه باكتري‌ها در برابر مولكول‌هاي بزرگ و مولكول‌هاي آب‌گريز غيرقابل نفوذ هستند،‌ مي‌توانيم بخشي از اين نفوذ ناپذيري را به خاطر وجود اندوتوكسين‌ها بدانيم. همچنين اندوتوكسين‌ها را مي‌توان آنتي‌ژن‌هاي ضعيفي دانست.

تفاوت اصلي اندوتوكسين و اگزوتوكسين در اين است كه اندوتوكسين ساختاري از ليپو پلي ساكاريد داشته اما اگزوتوكسين‌ها پروتئين‌هاي محلول در باكتري‌هاي بيماري‌زا مي‌باشند. تفاوت بعدي آن‌ها اين است كه اگزوتوكسين‌ها از هردو باكتري گرم منفي و گرم مثبت توليد مي‌شوند اما اندوتوكسين‌ها فقط حاصل باكتري‌هاي گرم منفي هستند. سومين تفاوت بين اين دو گروه اين است كه اگزوتوكسين به يك باكتري  خاص مختص مي‌شود در صورتي كه اندوتوكسين اينگونه نيست. اندوتوكسين نسبت به حرارت پايدار است و اگزوتوكسين پايداري نسبت به حرارت ندارد.

از ديگر تفاوت‌هاي اندو و اگزوتوكسين‌ها مي‌توانيم به اين موضوع اشاره كنيم كه اگزوتوكسين‌ها آنتي ‌ژن‌هاي قوي اما اندوتوكيسن‌ها از نظر آنتي‌ ژن ضعيف هستند. اگزوتوكيسن‌ها جهت خنثي سازي سم آنتي اكسين ترشح مي‌كنند كه اين قابليت در اندوتوكسين‌ها وجود ندارد.

در اوایل قرن بیستم میلادی، اندوتوکسین‌ها به علت تاثیر گرمازایی (تب القائی) و همچنین اثرشان بر سیستم ایمنی مورد بررسی قرار گرفتند. این عوامل که سبب ایجاد تب می‌شوند می‌توانند بسیار خطرناک باشند و گاهی به مرگ نیز منجر می‌شوند. بنابراین شناخت آن‌ها و انجام تست تب‌ زایی پیش از به کار بردن هرگونه محصول پزشکی اعم از تجهیزات، داروها و... امری بسیار ضروری است. 

 

کیت اندوتوکسین چیست؟

 

 

مقدار اندوتوکسین در نمونه‌های پروتئین، پپتید یا آنتی بادی از طریق آزمایش Limulus Amebocyte Lysate (LAL) توسط کیت اندوتوکسین اندازه‌گیری می‌شود. غلظت اندوتوکسین در نمونه‌های آزمایش توسط کیت LAL توسط سیگنال Chromogenic  در هنگام حضور اندوتوکسین محاسبه می‌شود. این اندازه‌گیری بر روی یک خواننده جذب میکروپلاگین در یک نانومتر 405 انجام می‌شود. نمونه‌های پروتئینی و آنتی‌بادی در هر 30 دقیقه اندازه‌گیری می‌شوند. اهمیت تعیین مقدار سطح اندوتوکسین در ارزیابی کارایی روش‌های حذف اندوتوکسین و همچنین جلوگیری از ضربات اندوتوکسیک و جانورانی که با پروتئین‌های آلوده به اندوتوکسین تزریق می‌شوند بسیار زیاد است.

 

روش‌های اندازه‌گیری اندوتوکسین

 

1- ژل کلات: در این روش از دو نوع کیت مولتی و کیت سینگل جهت سنجش اندوتوکسین استفاده می‌شود. روش ژل کلات را می‌توانیم راحت‌ترین و ساده‌ترین روش تست اندوتوکسین بدانیم. از آن‌جایی که در این تست تنها وجود یا عدم وجود اندوتوکسین در یک حساسیت خاص تعیین می‌شود، دارای دقت بالایی بوده و نیازی به تجهیزات گران قیمت در آزمایشگاه ندارد. حساسیت شایع مورد استفاده در ژل کلات  0.125EU/ml و 0.25  است.

2- کرموژنیک: این روش عمدتا به صورت کمی انجام می‌شود و میزان اندوتوکسین در یک رنج مشخص اندازه‌گیری و حاصل تست به صورت یک عدد ثابت مشخص می‌شود. در روش کرموژنیک به دستگاه‌هایی نظیر اسپکتوفتومتر نیاز داریم. شرکت‌هایی مانند لونزا و اندوسیف کیت سنجش هر دو تست را دارند.  

 

نحوه آزمایش اندوتوکسین

 

مقدار اندوتوکسین با تست LAL محاسبه می‌شود. برای انجام این تست از سلول‌های خونی (آمبوسیت) خرچنگ‌های نعل اسبی استفاده می‌شود. به این صورت که اندوتوکسین سبب فعال شدن فاکتوری در این سلول‌ها شده که نتیجه آن آغاز فرآیند انعقادی است. علاوه بر این آمبوسیت‌ها تمایل بسیار زیادی از خود به سطوح پایین اندوتوکسین نشان می‌دهند بنابراین جهت تشخیص اندوتوکسین در آب کاربرد فراوانی دارند.

 

کاربرد کیت اندوتوکسین

 

کیت اندازه‌‌گیری تشخیصی بالینی CFDA را پاک می‌کند و به همین ترتیب مقدار اندوتوکسین مجود در پلاسمای انسان را مشخص می‌کند. همان‌طور که گفتیم افزایش سطح اندوتوکسین معمولا سبب ایجاد تب، کاهش یا افزایش تعداد گلبول‌های سفید موجود در خون و در برخی از موارد باعث شوک قلبی- عروقی می‌شود. این بر اساس مسیر فاکتور C در آزمایش پولیموس است. 

کیت سنجش سطح اندوتوکسین از طریق  میکروپلیت خوانی پینتیک و نرم افزار اندازه‌گیری اندوتوکسین، در کمتر از یک ساعت مقدار اندوتوکسین موجود در پلاسمای انسان را محاسبه می‌کند. این کیت به همراه معرف پیش از پلاسما است که سبب از بین بردن فاکتورهای مهار کننده در پلاسما در طی تست اندوتوکسین می‌شود. 

 

قیمت کیت اندوتوکسین

 

برای اطلاع از ویژگی‌ها و انواع کیت اندوتوکسین و همچنین قیمت‌ و خرید کیت‌های سنجش اندوتوکسین، می‌توانید به سایت جویشگر به آدرس زیر مراجعه کنید.

منبع: